國家生物安全法解讀｜實(shí)驗(yàn)動物管理、意外事故及防范
2022.03.18《中華人民共和國生物安全法》2020年10月17日第十三屆全國人民代表大會常務(wù)委員會第二十二次會議通過，2021年4月15日起施行。
《中華人民共和國生物安全法》第五章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 第四十七條 病原微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)采取措施，加強(qiáng)對實(shí)驗(yàn)動物的管理，防止實(shí)驗(yàn)動物逃逸，對使用后的實(shí)驗(yàn)動物按照國家規(guī)定進(jìn)行無害化處理，實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動物可追溯。禁止將使用后的實(shí)驗(yàn)動物流入市場。
第九章 法律責(zé)任 第七十七條 違反本法規(guī)定，將使用后的實(shí)驗(yàn)動物流入市場的，由縣級以上人民政府科學(xué)技術(shù)主管部門責(zé)令改正，沒收違法所得，并處二十萬元以上一百萬元以下的罰款，違法所得在二十萬元以上的，并處違法所得五倍以上十倍以下的罰款；情節(jié)嚴(yán)重的，由發(fā)證部門吊銷相關(guān)許可證件。
病原微生物的動物感染實(shí)驗(yàn)，是生物安全事故的重要風(fēng)險(xiǎn)防范點(diǎn)。感染的動物攜帶的病原體在操作過程中可通過空氣氣溶膠、分泌物、排泄物等感染實(shí)驗(yàn)工作人員。
動物感染的操作涉及動物的麻醉、給藥、樣本采集、安樂死和剖檢，雞胚實(shí)驗(yàn)也可歸于感染動物的操作，會產(chǎn)生各種意外事故。本文將從意外事故類型，應(yīng)急預(yù)案、事故現(xiàn)場操作要點(diǎn)以及意外事故的預(yù)防一一闡述。
1 動物實(shí)驗(yàn)意外事故類型
01）刺傷或切割傷 刺傷經(jīng)常發(fā)生在麻醉、給藥、采樣、雞胚接種等過程。切割傷經(jīng)常發(fā)生于手術(shù)、解剖等過程。
02）抓咬傷 抓咬傷經(jīng)常發(fā)生于：墊料更換、麻醉、體溫測定等過程。
03）動物逃逸 常發(fā)生于麻醉、墊料更換等過程中。
04）麻醉過量 中大型動物的麻醉過量視為意外事故。
05）雞胚實(shí)驗(yàn)意外
接種雞胚時的刺傷
收集病毒時的溢灑
運(yùn)送雞胚時的跌落
2 動物實(shí)驗(yàn)意外事故應(yīng)急預(yù)案
針對可能出現(xiàn)的感染性動物實(shí)驗(yàn)意外事故，為保障生物安全實(shí)驗(yàn)室安全穩(wěn)定運(yùn)轉(zhuǎn)，應(yīng)制定有效的意外事故處置預(yù)案。
發(fā)生意外事故處置時處置程序的原則是保護(hù)工作人員健康和安全，將對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和外部環(huán)境的污染降到最低。
采取措施的原則是控制擴(kuò)散，控制傳染源，安全處理污染物品和污染場所。
應(yīng)急預(yù)案應(yīng)包括(不限于）:負(fù)責(zé)人、組織、應(yīng)急通訊、報(bào)告內(nèi)容、個體防護(hù)和應(yīng)對程序、應(yīng)急設(shè)備、撤離計(jì)劃和路線、污染源隔離與消毒滅菌、人員隔離和救治、現(xiàn)場隔離和控制、風(fēng)險(xiǎn)溝通等。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)培訓(xùn)所有人員（包括來訪人員）熟悉應(yīng)急程序、撤離路線和撤離集合地點(diǎn)；每年至少進(jìn)行一次演習(xí)。
3 動物實(shí)驗(yàn)意外事故現(xiàn)場處理操作要點(diǎn)
在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)出現(xiàn)動物意外事故時，現(xiàn)場處置至關(guān)重要，細(xì)節(jié)上的處理會極大降低實(shí)驗(yàn)室污染和人員感染的風(fēng)險(xiǎn)。同時配備必要的急救設(shè)備和器材，以備現(xiàn)場處理使用，急救箱的位置：應(yīng)置于防護(hù)區(qū)內(nèi)，組成（包括但不限于）：75%乙醇、碘伏、創(chuàng)可貼、紗布、繃帶、剪刀/鑷子、醫(yī)用膠布等。
01） 針刺傷/切割傷和抓咬傷的現(xiàn)場處理
① 立即終止實(shí)驗(yàn)，將實(shí)驗(yàn)動物放置于密封籠具中。
② 另一位實(shí)驗(yàn)人員向受傷人員受傷及全身噴灑75%乙醇，脫去手套（生物安全柜內(nèi)）
③ 用手?jǐn)D壓局部使血液流出，用清水或洗眼器內(nèi)的水沖洗傷口。
④ 取出急救箱，對污染的皮膚和傷口用碘伏或者適當(dāng)消毒劑多次擦拭。
⑤ 對傷口進(jìn)行適當(dāng)包扎，戴干凈手套后按規(guī)定路線撤離退出實(shí)驗(yàn)室
⑥ 事故報(bào)告
⑦ 醫(yī)學(xué)評價(jià)/定點(diǎn)醫(yī)院救治/隔離等
該類事故現(xiàn)場處理的重點(diǎn)：
① 控制動物
② 清理傷口
02）動物逃逸的現(xiàn)場處理
① 立即停止實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行捕殺，原則上人員在未抓獲逃逸動物前不得離開動物實(shí)驗(yàn)室。
② 如小型嚙齒動物逃逸到實(shí)驗(yàn)室，則立即用長柄鑷子，快速、穩(wěn)準(zhǔn)夾住動物尾根部抓取動物并放入籠盒中。如果動物逃逸迅速、用鑷子不易抓取時，則用專用網(wǎng)兜進(jìn)行抓取。如果動物逃逸到設(shè)備下面不易抓取的地方，使用網(wǎng)兜手柄（網(wǎng)兜可拆分為手柄和網(wǎng)兜）小心將動物趕出設(shè)備再行抓取。
③ 增加室內(nèi)換氣次數(shù)，對動物逃逸路線及動物噴濺出的血液、分泌物用濕的消毒布或紙巾覆蓋消毒30分鐘后，置于規(guī)定的容器內(nèi)待高壓滅菌；并報(bào)告值管人員組織二次洗消。
該類事故現(xiàn)場處理的重點(diǎn)：
① 嚙齒類動物逃逸較常發(fā)生，抓捕應(yīng)局限于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，切忌慌亂、多次夾取。盡量減少對動物的刺激。
② 原則上逃逸動物未撲殺之前不得退出實(shí)驗(yàn)室，避免動物逃逸出實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入公共區(qū)域，造成更大的公共衛(wèi)生事件。
03）麻醉過量的現(xiàn)場處理
麻醉過量的表現(xiàn)
輕度：指實(shí)驗(yàn)動物呼吸頻率明顯減慢有輕度的缺氧表現(xiàn)，如舌頭由鮮紅變暗，但仍然是有規(guī)律的自主呼吸。呼吸深度正常，循環(huán)系統(tǒng)無明顯障礙。血壓、心跳正常。
重度：呼吸頻率大幅度下降且不規(guī)律，時有時無，忽深忽淺，明顯的缺氧表現(xiàn)，如舌頭發(fā)紫，測血中的氧分壓和氧飽和度均明顯下降，循環(huán)系統(tǒng)受影響，如心跳減慢，血壓下降。但是，角膜反射存在。
危重：呼吸停止，心跳減慢，且不規(guī)律，血壓下降，或心跳驟停。
處理方法
① 呼吸極慢、不規(guī)則，但心跳正常時：給予人工呼吸-壓胸法，適當(dāng)給予蘇醒劑。
② 呼吸停止仍有心跳時：①實(shí)施人工呼吸，必要時可使用人工呼吸機(jī)或吸氧（吸入氣中O2占95％，CO2占5％）；②注射50％葡萄糖液；③給腎上腺素及蘇醒劑。用5%碳酸氫鈉靜脈點(diǎn)滴，糾正酸中毒。
③ 呼吸、心跳均停止時：用強(qiáng)心劑l:10000腎上腺素溶液心內(nèi)注射。注射呼吸興奮劑25%尼克剎米，靜脈注射或心內(nèi)注射。注射20mg/mL多巴胺提高血壓。用5%碳酸氫鈉靜脈點(diǎn)滴，糾正酸中毒。
該類事故現(xiàn)場處理的重點(diǎn)：
① 中大型動物易發(fā)生麻醉過量。
② 麻醉過量急救時防止抓咬傷。
04）雞胚實(shí)驗(yàn)意外事故處理
接種雞胚時的刺傷-處理同1“刺傷處理”
收集病毒時的溢灑-處理同“感染性物質(zhì)溢撒”
運(yùn)送雞胚時跌落的處理
① 用吸水紙覆蓋住跌落區(qū)域，由外向內(nèi)傾倒含1%有效氯消毒劑，將蛋殼及蛋黃等固體包住后用鑷子收集置于規(guī)定的容器內(nèi)待高壓滅菌；并報(bào)告值管人員組織二次洗消。
② 跌落區(qū)域1米半徑以內(nèi)用消毒液傾倒，作用30分鐘。
③ 實(shí)驗(yàn)人員全身噴灑消毒液后按規(guī)定線路退出。
④ 報(bào)告值班人員對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行二次洗消。
該類事故現(xiàn)場處理的重點(diǎn)：
① 蛋黃歸屬于固體物質(zhì)，需收集后高壓。
② 尿囊液較粘稠，消毒的時間要比一般液體長。
③ 消毒劑選擇取決于所操作病原，含氯消毒劑為通用消毒劑。
4 防患于未然-動物實(shí)驗(yàn)意外事故的預(yù)防
01）針刺、切割傷、抓咬傷
① 戴防護(hù)手套：防咬傷手套/防割傷手套。
② 使用合適的固定器。
③ 動物麻醉充分后操作。
02）動物逃逸
① 動物麻醉充分后操作。
② 參加動物保定技術(shù)培訓(xùn)。
③ 生物安全柜內(nèi)操作。
④ 籠具確定蓋好后放回籠具架；靈長類動物需要配合適的籠鎖。
03）麻醉過量
① 使用麻醉劑。
② 少量分次給藥。
a)動物在麻醉期體溫容易下降，要采取保溫措施。
b)靜脈注射必須緩慢，同時觀察肌肉緊張、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動明顯減弱或消失時，應(yīng)立即停止注射。做慢性實(shí)驗(yàn)時，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動物體溫水平。
③ 配備麻醉急救藥：強(qiáng)心劑，呼吸中樞興奮劑，碳酸氫鈉（用于糾正酸中毒），高滲葡萄糖（用于升血壓）等。
04）雞胚實(shí)驗(yàn)
雞胚轉(zhuǎn)運(yùn)使用運(yùn)輸容器。接種了微生物的雞胚在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)時應(yīng)使用雙層硬質(zhì)不破耐高壓包裝，以防跌落時噴濺溢撒，將病原微生物局限在包裝容器內(nèi)，便于后續(xù)消毒滅菌。
主要參考文獻(xiàn)
1.瞿滌，鮑琳琳，秦川. 《動物生物安全實(shí)驗(yàn)室操作指南》，科學(xué)出版社，北京，2019
2.中國合格評定中心.《生物安全實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可與管理基礎(chǔ)知識 生物安全三級實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化管理指南》，中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，北京，2012
3.T/CALAS 7—2017 《實(shí)驗(yàn)動物 動物實(shí)驗(yàn)生物安全通用要求》中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)
4.秦川. 《實(shí)驗(yàn)室生物安全事故防范和管理》，科學(xué)出版社，北京，2017
轉(zhuǎn)載來源：未來實(shí)驗(yàn)室學(xué)苑
WRITER STORY
范薇，預(yù)防獸醫(yī)學(xué)博士，長期從事實(shí)驗(yàn)動物微生物、生物安全、動物福利、職業(yè)健康的科研、監(jiān)測及實(shí)驗(yàn)動物福利倫理審查工作，先后主持及參與了多項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)及北京市地方標(biāo)準(zhǔn)的研究。具有豐富的實(shí)驗(yàn)動物微生物寄生蟲質(zhì)量監(jiān)控、生物安全管理、風(fēng)險(xiǎn)評估及福利倫理個案審查的經(jīng)驗(yàn)。曾榮獲中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會科學(xué)技術(shù)獎“三等獎”；中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會科學(xué)技術(shù)獎“優(yōu)秀青年人才獎”；“優(yōu)秀教師”等榮譽(yù)。
